Influência da contaminação sanguínea e dos procedimentos de descontaminação na resistência de união

Ano : 2019

Rafael Guerra Lund 1 , Isadora Augusta Da Silveira 1 , Juliana Silva Ribeiro 1 , Dayane Rubin 1 , Sonia Luque Peralta 2 , Carlos Enrique Cuevas-Suárez 3 , Evandro Piva 1 1 Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Departamento de Odontologia Restauradora, Faculdade de Odontologia, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil


Objetivo: Este estudo avaliou o efeito da contaminação do sangue e procedimentos de descontaminação realizados em diferentes estágios da colagem, na resistência de união à microtração (μTBS) de um adesivo condicionador e enxágue na dentina. Materiais e métodos:Cavidades cilíndricas padronizadas foram preparadas em incisivos bovinos e foram divididas aleatoriamente em cinco grupos, cada um foi tratado nas seguintes condições experimentais - Controle: condicionamento-enxágue / colagem sem contaminação sanguínea; Grupo 1: ataque ácido / contaminação sanguínea / descontaminação / colagem; Grupo 2: ataque ácido / colagem / contaminação / descontaminação sanguínea; Grupo 3: ataque ácido / colagem / contaminação sanguínea / descontaminação / ataque ácido / colagem; e Grupo 4: ataque ácido / contaminação sanguínea / descontaminação / ataque ácido / colagem. As amostras foram preparadas para μTBS e avaliadas imediatamente e após 6 meses de armazenamento em água destilada. Resultados: A contaminação de sangue reduziu significativamente o μTBS ( P<0,001). Os grupos 2 e 3 apresentaram os menores valores de μTBS, tanto para o envelhecimento de 24 he de 6 meses. Conclusões: A contaminação sanguínea testada em qualquer uma das diferentes etapas do procedimento de colagem mostrou um efeito negativo no μTBS. A recuperação da adesão da dentina contaminada com sangue não dependeu apenas da limpeza com água destilada.

Palavras-chave:  Contaminantes, descontaminação, agentes adesivos de dentina, microtração, resina composta


Introdução


Os sistemas adesivos atuais são aplicados usando uma técnica de “ataque e enxágue”, “autocondicionamento” ou “corrosão seletiva”, que difere em como os adesivos são aplicados e como eles interagem com as estruturas dentais. Os sistemas de condicionamento e enxágue compreendem ácido fosfórico para pré-tratar os tecidos duros dentais antes do enxágue e posterior aplicação de um adesivo. Na abordagem de condicionamento ácido e enxágue, os adesivos são aplicados após o condicionamento ácido fosfórico, ao passo que, na técnica de autocondicionamento, a etapa de condicionamento ácido é eliminada, simplificando o procedimento. As evidências disponíveis hoje sugerem que a escolha entre sistemas de corrosão e enxágue ou autocondicionante é geralmente uma questão de preferência pessoal. Em geral, a técnica de condicionamento ácido é frequentemente preferida para restaurações indiretas e quando grandes áreas de esmalte ainda estão presentes.

A eficácia dos sistemas adesivos de dentina após protocolos de aplicação clínica adequados é necessária para garantir a longevidade das restaurações. Clinicamente, muitos fatores são conhecidos por prejudicar a adesão e retenção de materiais restauradores contendo resina, como a contaminação do campo operatório com fluidos orais e microorganismos. Para evitar isso, o dique de borracha ainda é a ferramenta mais importante para garantir o controle da umidade. No entanto, o controle da umidade é difícil em algumas situações clínicas, como cárie localizada na margem gengival ou próxima a ela, e é provável que ocorra contaminação do campo operatório com sangue ou saliva.


Estudos anteriores que avaliaram o efeito da contaminação do sangue durante os procedimentos de colagem mostraram que isso poderia levar à falha prematura da ligação de compósitos de resina fotopolimerizáveis, mesmo após vários métodos de descontaminação. A contaminação do campo operatório pode ocorrer em diferentes momentos críticos do procedimento de colagem: antes ou após o condicionamento ácido, após a aplicação do adesivo sem ativação por luz, após a aplicação do adesivo e aplicação de luz, durante a inserção de uma resina composta em incrementos e após a colocação da restauração. Além disso, poucos estudos avaliaram o efeito da contaminação do sangue em sistemas adesivos convencionais.


Assim, este estudo teve como objetivo avaliar a resistência de união de um sistema adesivo de condicionamento ácido em duas etapas à dentina na presença de contaminação sanguínea e determinar qual protocolo de descontaminação é capaz de recuperar a aderência. As hipóteses nulas a serem testadas foram que (1) a contaminação do sangue não prejudicará a resistência de união à dentina e que (2) os protocolos de descontaminação testados serão capazes de recuperar a resistência de união à dentina de um condicionamento ácido e enxágue em duas etapas adesivo.



Materiais e métodos


Vinte incisivos bovinos recém-extraídos foram coletados e armazenados em solução de Cloramina-T 0,5% por 7 dias. Os dentes foram então mantidos em água destilada a 4 ° C até o uso. Os critérios de seleção dos dentes incluíram esmalte bucal intacto, sem cáries, rachaduras e danos por extração. Cada dente foi examinado em um estereomicroscópio para eliminar dentes com trincas ou defeitos hipoplásicos. Todos os dentes foram limpos com raspadores manuais e bisturis e, a seguir, suas raízes foram seccionadas com serra diamantada de baixa rotação sob refrigeração a água, e suas coroas foram embutidas em resina de poliéster (Resina cristal, Comfibras, Porto Alegre - Brasil), permitindo a superfície do esmalte bucal a ser exposta. Em seguida, o esmalte foi removido com um polidor ortodôntico e, em seguida, a superfície dentinária exposta foi moída com lixas de SiC 400 e 500 grit acopladas a uma polidora universal na velocidade de 50 rpm, sob irrigação constante com água.


Cavidades cilíndricas padronizadas foram preparadas na dentina plana usando uma broca diamantada de roda redonda (nº 3056, KG Sorensen, Alphaville, SP, Brasil) sob irrigação com água. A broca de diamante era substituída a cada cinco preparações para garantir um corte eficiente. As dimensões da cavidade foram 4,0 ± 0,1 mm de diâmetro e 1,0 ± 0,1 mm de profundidade [Figura 1] . Os dentes com as cavidades preparadas foram divididos em cinco grupos experimentais de seis dentes cada, e estes foram atribuídos aleatoriamente a um dos cinco protocolos de contaminação e descontaminação sanguínea usados [Figura 2]. Sangue humano fresco foi coletado da ponta do dedo de uma voluntária (protocolo de aprovação do comitê de ética nº 41/11 Odontologia / UFPel) ao mesmo tempo em que os processos de restauração eram realizados. Nos grupos de contaminação por sangue, as amostras foram enxaguadas com água destilada e secas com papel toalha esterilizado.


Figura 1: Representação esquemática do processo de resistência à microtração utilizado. (a) Seccionamento da raiz. (b). Coroa embutida em resina poliéster. (c) Superfície da dentina exposta. (d) Preparação da cavidade cilíndrica. (e) Procedimentos de colagem. (f) Incrementos de resina composta micro-híbrida. (g) Corte de espécimes. (h) Vigas de resistência de ligação à microtração




Figura 2: Grupos experimentais e protocolos de descontaminação


Os procedimentos restauradores foram realizados com um sistema adesivo condicionador e enxágue de duas etapas (Single Bond; 3M ESPE, St Paul, MN, EUA) aplicado de acordo com as recomendações do fabricante. Gel de ácido fosfórico (Scotchbond etchant; 3M ESPE, St Paul, MN, EUA) foi aplicado durante 15 se, em seguida, enxaguado por 10 s. O excesso de água foi removido com papel toalha esterilizado, deixando a dentina úmida. Em seguida, duas camadas consecutivas de adesivo foram aplicadas na dentina condicionada usando um microbrush. Uma corrente de ar foi aplicada por 5 s entre cada demão. O adesivo foi fotopolimerizado usando uma unidade de fotopolimerização de diodo emissor de luz (LED) (Radii Cal, SDI Limited, Victoria, Austrália) com uma irradiância de luz de 900 mW / cm 2. Após a fotopolimerização do adesivo, uma resina composta microhíbrida (Filtek Z-250; 3M ESPE, St. Paul, MN, EUA) foi aplicada em quatro incrementos de aproximadamente 1,0 mm de espessura. Cada incremento foi fotopolimerizado por 20 s com uma unidade de polimerização de luz equipada com uma fonte de luz visível LED (Radii Cal; SDI, Bayswater, Victoria, Austrália).


Após armazenamento em água destilada a 37 ° C por 24 h, os espécimes foram seccionados perpendicularmente às interfaces de ligação nas direções mesiodistal e vestibulolingual, usando uma serra de diamante de baixa velocidade (Isomet Saw 1000 Precision, Buehler Ltd., Lake Bluff, IL , EUA) para obter vigas de resina-dentina com área de seção transversal de aproximadamente 0,5 mm 2. Seis vigas de cada dente foram obtidas, fornecendo 30 palitos por grupo para o teste de resistência de união à microtração (μTBS). Metade das vigas foi ensaiada após 24 he a outra metade, após 6 meses de armazenamento em água destilada a 37 ° C ( n = 15). As vigas foram fixadas a um dispositivo de teste de microtração com cola de cianoacrilato (Super Bonder Gel, Loctite ® Corp., Henkel Technologies, Diadema, SP, Brasil), e o μTBS foi testado em uma máquina de ensaio mecânico universal (DL 500, EMIC ® , Pinhais, PR, Brasil), a uma velocidade da cruzeta de 0,5 mm / min e uma célula de carga de 100 N.


Os valores de μTBS foram expressos em MPa dividindo-se a carga (N) aplicada no momento da fratura pela área da seção transversal da interface colada (μTBS = F / A). Os modos de fratura foram avaliados por um único observador, utilizando um microscópio de luz (Mobiloskop; Renfert, Hilzingen, Alemanha) em × 100 e × 500. Os modos de falha foram classificados como adesivo, coesivo dentro da dentina e coesivo dentro da resina composta ou falha mista.


Os dados foram analisados ​​para verificação de normalidade (teste de Shapiro-Wilk) e homocedasticidade (teste de Levene). A análise de variância de duas vias (ANOVA) foi usada para avaliar o efeito da etapa de contaminação e o tempo de armazenamento no μTBS. Os procedimentos de comparação múltipla foram realizados pelo teste de Tukey (α = 5%). Os dados foram analisados ​​e plotados com o software SigmaPlot 12 (Systat Software Inc., San Jose, CA, EUA).



Resultados


Os resultados do teste μTBS estão resumidos na [Figura 3] a. O teste ANOVA de duas vias revelou que o μTBS foi influenciado tanto pelo protocolo de descontaminação quanto pelo tempo de armazenamento ( P <0,05); entretanto, a interação entre essas duas variáveis ​​não foi significativa ( P = 0,529).


Figura 3: Resistência à microtração (a) e distribuição dos modos de falha (b). As colunas sob a mesma linha horizontal não indicam diferenças entre os tempos de envelhecimento para cada grupo. Letras maiúsculas ou minúsculas diferentes indicam diferenças entre os grupos em 24 horas e 6 meses, respectivamente.



No teste μTBS de 24 h, os maiores valores de resistência de união foram observados para o Grupo Controle, seguido pelo Grupo 1; os menores valores de μTBS foram observados para o Grupo 3. Após 6 meses de armazenamento em água destilada, os valores de μTBS diminuíram em todos os grupos; o Grupo Controle apresentou os maiores valores, enquanto o Grupo 2 apresentou os menores valores de μTBS; no entanto, essas diferenças não foram estatisticamente significativas. A análise intergrupo revelou que os valores de μTBS para os Grupos 3 e 4 permaneceram estáveis.


Os números e porcentagens dos modos de falha em cada grupo são mostrados na [Figura 3]b. Os resultados da análise do modo de falha após 24 horas demonstraram que o modo de falha do tipo adesivo foi predominante em todos os grupos, seguido pela falha do tipo misto. Após 6 meses de envelhecimento, os resultados da análise do modo de falha demonstraram que o modo de falha do tipo adesivo permaneceu predominante em todos os grupos, seguido pelo tipo de falha coesiva na dentina.



Discussão


Neste estudo, foi investigada a influência da contaminação por sangue na resistência de união de um adesivo condicionador e enxágue de duas etapas à dentina. Além disso, foi determinado o protocolo de descontaminação que seria capaz de recuperar a resistência de união desse sistema adesivo. Uma vez que a análise estatística revelou que a contaminação do sangue prejudicou a resistência de união de uma resina composta à dentina e que nenhum dos protocolos de descontaminação testados foi capaz de recuperar a resistência de união, as hipóteses nulas testadas neste estudo foram rejeitadas.


Neste estudo, sangue recém-colhido, coletado ao mesmo tempo que o experimento estava sendo realizado, foi usado para contaminar as superfícies de dentina. Nenhum anticoagulante foi usado, uma vez que estudos na literatura mostraram que a adição de um anticoagulante pode reduzir a resistência de união. Considerando essa variável e outros fatores como o sistema adesivo usado, a etapa em que ocorre a contaminação e o tipo de substrato, foi difícil fazer comparações com estudos anteriores que investigaram a contaminação por sangue de restaurações adesivas.


Os resultados obtidos neste estudo comprovaram que, quando comparados ao grupo controle, qualquer contaminação sanguínea em qualquer uma das etapas de aplicação do sistema adesivo diminuiu o μTBS, tanto em 24 he após 6 meses. A literatura tem mostrado que o sangue é capaz de interagir com a superfície da dentina, e o conteúdo de proteínas, macromoléculas de fibrinogênio e plaquetas pode formar uma película fina na superfície da dentina, o que pode dificultar a infiltração do adesivo no dentina tratada, enfraquecendo assim a resistência de união. Além disso, proteínas sanguíneas residuais podem permanecer na superfície de ligação polimerizada e eliminar uma camada inibida por oxigênio, que tem o potencial de prevenir a copolimerização entre os incrementos sucessivos de resina composta.


Dentre os protocolos de descontaminação, quando a contaminação ocorreu após a aplicação do ácido e antes da aplicação do sistema adesivo (Grupo 1), os valores de resistência de união foram superiores aos dos demais grupos contaminados, tanto em 24 he após 6 meses. Esses resultados podem ser explicados pelos processos de limpeza realizados após a contaminação do sangue, que foram capazes de eliminar grande parte das proteínas sanguíneas depositadas nas superfícies dentinárias. Além disso, pode-se hipotetizar a aplicação de primer limpo ou sangue hidrolisado na superfície dentária. No entanto, como nenhum valor igual ao do grupo controle foi obtido, enxágue com água mostrou-se insuficiente para atingir a descontaminação completa da superfície dentinária.


Quando a contaminação ocorreu após a aplicação do sistema adesivo (Grupos 2 e 3), a diminuição da resistência de união pode ser atribuída à degradação dos componentes adesivos da camada adesiva contaminada, e não à sua remoção. Além disso, a presença de umidade excessiva aprisionada nos componentes degradados nos túbulos dentinários pode ter prejudicado a adesão entre as camadas subsequentes do compósito de resina (incrementos).


Além disso, neste estudo, foi possível demonstrar que, após a superfície dentinária ter sido contaminada, não era recomendável fazer um novo condicionamento da superfície contaminada. Nos Grupos 3 e 4, nos quais um procedimento de re-condicionamento foi realizado após a contaminação do sangue, valores mais baixos de μTBS também foram observados. Uma possível explicação para isso poderia ser que o re-condicionamento da superfície dentinária poderia produzir uma camada excessiva de dentina desmineralizada, que não poderia ser totalmente penetrada pelo sistema adesivo, permitindo a formação de uma área adesiva frágil.


Este estudo mostrou o efeito negativo que a contaminação do sangue tem sobre a adesão à dentina quando se usa um sistema adesivo condicionador e enxágue de duas etapas. Além disso, pôde-se estabelecer que a recuperação do adesivo em superfícies dentinárias contaminadas com sangue não dependia apenas de limpeza cuidadosa com água destilada, e outros agentes de limpeza devem ser testados em estudos futuros.



Conclusões


Os achados deste estudo provaram que a contaminação por sangue prejudicou significativamente a resistência de união de adesivos de condicionamento ácido e enxágue de duas etapas à dentina. Além disso, nenhum dos protocolos de descontaminação testados foi capaz de recuperar a resistência de união. Portanto, quando a superfície da dentina foi contaminada com sangue durante os procedimentos de colagem da restauração com o uso de adesivos de ataque e enxágue de duas etapas, a superfície da dentina deve ser re-preparada com um cortador rotativo para evitar prejuízo da eficiência da colagem de o sistema adesivo.


Agradecimentos


Este trabalho foi financiado pela Fundação de Amparo à Pesquisa do Rio Grande do Sul - Brasil (FAPERGS APE 12/05783 e PRONEX 16.0471-4). Este estudo também foi parcialmente financiado pela Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código Financeiro 001, Brasil. O autor, Carlos Enrique Cuevas Suárez, gostaria de agradecer ao PRODEP, México (DSA / 103.5 / 15/6615).


Apoio financeiro e patrocínio


Zero.


Conflitos de interesse


Não há conflitos de interesse.




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